미생물실험>Plasmid DNA purification and 전기영동(Electrophoresis)
목차
1. 제목( Subject )
2. 실험목적(purpose)
3. 재료 및 기구 ( Material and Apparatus )
4. 실험방법 ( Methods )
5. 실험결과( Results )
6. 고찰 ( Disccussion )
7. 참고문헌( Reference )
본문내용
1. 제목( Subject ) : Plasmid DNA purification and 전기영동(Electrophoresis)
2. 실험목적(purpose)
미리 배양된 E.coli를 plasmid DNA를 purification 하고 이것을 Agarose Gel 전기영동을 통해 분리하여 확인한다.
3. 재료 및 기구 ( Material and Apparatus )
pippet, plasmid DNA, rack, pippet tip, centrifuge(미량원심분리기), 전기영동장치, comb, LB(+amp) broth, buffer P1(resuspend), buffer P2(lyse), buffer N3(neutralize), spin column, buffer PE(wash), EB buffer(elution), eppen tube
DNA & Plasmid DNA from Bacteria가. Agarose gel ElectrophoresisAgarose Gel 은 DNA Fragment을 Size에 의해 분리하는데 매우 유용한 Tool로써 수백개의 Base Pair를 가진 DNA로부터 20kd까지의 DNA Fragement을 분리해 낼수 있다. 또한 Agarose Gel Electrophorsis를 이용함으로써 보다 큰 DNA Fragment (1000 - 2000Kd 에 달하는) 까지도 분리해 낼수 있다.Agarose Gel Electrophoresis는 원리상으로는 SDS-PAGE등의 다른 Electrophoresis 방법과 유사하다. 즉 DNA Molecule은 Negative Charge (Phosphate Backbone의) 를 띄고 있기 때문
DNA & Plasmid DNA from Bacteria가. Agarose gel ElectrophoresisAgarose Gel 은 DNA Fragment을 Size에 의해 분리하는데 매우 유용한 Tool로써 수백개의 Base Pair를 가진 DNA로부터 20kd까지의 DNA Fragement을 분리해 낼수 있다. 또한 Agarose Gel Electrophorsis를 이용함으로써 보다 큰 DNA Fragment (1000 - 2000Kd 에 달하는) 까지도 분리해 낼수 있다.Agarose Gel Electrophoresis는 원리상으로는 SDS-PAGE등의 다른 Electrophoresis 방법과 유사하다. 즉 DNA Molecule은 Negative Charge (Phosphate Backbone의) 를 띄고 있기 때문
분자생물학실습 실험보고서1. Object제한효소 활용 및 Ligation, 전기영동, plasmid prep. 등의 여러 실험을 통해 Gene cloning의 전반적인 실험 및 이해를 하고, PCR의 기초적인 간단한 실험을 함으로써 DNA와 유전자를 다루는 molecular biology에서의 이론적 측면뿐만 아니라 실험적인 측면 또한 함양한다.2. Date실험기간: 2011년 11월 7일 – 11일, 총 5일3. Experiment3.1. Day 1 - 제한효소를 이용한 DNA 절단 및 분석, Ligation3.1.1. Digestion of DNA with Restriction EnzymeI. Apparatus- Water b
전기영동을 통해 PCR product가 있는지 확인한다. 새로운 LB plate에 white colony를 stacking 한 후 37℃ incubator에서 배양한다. 4. DNA purificationCloning된 vector DNA를 추출해내기 위해 Wizard Plus SV Minipreps(Promega)를 사용한다. 먼저 ampicillin이 첨가된 LB-Broth 2㎖를 tube에 넣어주고 여기에 37℃ incubator에서 배양중인 plate에서 colony를 따서 넣어준다. 37℃ shacking incubator에서 overnight culture(18시간정도)한다. Overnight culture한 용액에서 1㎖를 꺼내 e.p tube에 넣어주고 8,000 rpm으로 10분
저작권 관련 사항 정보 및 게시물 내용의 진실성에 대하여 레포트샵은 보증하지 아니하며, 해당 정보 및 게시물의 저작권과 기타 법적 책임은 자료 등록자에게 있습니다. 위 정보 및 게시물 내용의 불법적 이용, 무단 전재·배포는 금지됩니다. 저작권침해, 명예훼손 등 분쟁요소 발견시 고객센터에 신고해 주시기 바랍니다.