일반생물학 실험 - mini preparation(plasmid DNA를 소량 분리하는 방법)실험

DNA: Inserted plasmid와 Only plasmid를 Electrophoresis를 하여 각각 분리해 낸다. Electrophoresis는 DNA분자의 크기가 클수록 느리게 이동하는 것을 이용한 분리방법이다. Electrophoresis에서 DNA의 이동에 영향을 주는 요인들이 있다. Agarose의 농도가 높을수록 느리게 이동한다. 그리고 DNA 형태(구조)에 따라 이동속도가 다르다. 일반적으로 Supercoiled DNA가 가장 빨리 이동하고, 그 다음이 Linear DNA, Open circular DNA가 가장 느리게 이동한다. 그리고, 전압이 높을수록 이동속도가 빠

분리된 plasmid DNA를 얻을 수 있다. 이를 통해 얻어진 plasmid DNA는 전기영동이나 제한효소를 이용한 절단을 통하여 확인이 가능하다.박테라아 세포로부터 plasmid DNA를 소량으로 분리하는 방법은 대단히 많지만 성공률과 속도를 생각하여 세 가지 방법으로 소개하면 Alkaline lysis prep, boiling method 그리고 lithium-based procedure 이다. 이중에서 가장 보편적인 방법은 Alkaline lysis 방법이다.2-1. Alkaline lysis miniprepalkaline lysis procedure(Bimboim, Doly, 1979)은 가장 일반적으로 쓰

plasmid DNA isolation - plasmid를 GFP를 운반하기 위한 Vector로 사용하기 위해 plasmid DNA를 isolation하여 한다. plasmid DNA를 isolation하는 방법 중 alkaline method를 사용하였다.세균에서 plasmid DNA를 추출하기 위한 방법은 배양된 세균을 centrifuge 한 후, Solution I, II, III를 넣어서 DNA를 분리 한다.●Solution I 50mM Glucos ,25mM Tris-Cl, 10mM EDTA로 구성되어 있고, 세균을 resuspension 시키기 위해 사용하며 세포 표면을 약화 시킨다. Glucos는 cell의 삼투압 유지하는 역할을 한다, Tris-Cl은 pH

일반생물학및실험 Report 2020 November 01생물학 실험 Report의생명공학과Ⅰ. 기본정보실험 제목: DNA Gel electrophoresis실험 목적: 플라스미드 DNA와 PCR 생산물을 전기영동을 통해 확인하는 실험실험자: antler11Ⅱ. 서론 (Introduction)1. PCR (polymerase chain reaction)PCR(polymerase chain reaction)은 1983년, K.B.Mullis가 고안한 것으로 특정염기서열을 증폭함으로써 DNA 염기서열 분석 및 현대 분사생물학의 발전을 가져왔다. PCR 방법에 가장 흔히 사용되는 DNA 중합효소(DNA polymerase)

생물학, 현문사, 2002, p333~3344) 전문진, 현대의 생물공학과 생물산업, 아카데미서적, 2003, p725) http://blog.naver.com/tjdndud435?Redirect=Log&logNo=1000233419536) http://blog.naver.com/applechips?Redirect=Log&logNo=600195939687) Robert F.Weaver, Molecular Biology, McGraw-Hill, 2007, p515PCR소량의 DNA를 대량으로 증폭시키는 방법으로 과학수사나, 유물발굴현장에서 DNA감정을 할 경우 소량의 DNA로는 보다 정확한 측정이 불가능 할 뿐 더러, 여러 번 실험이 불가능해 실험의 정확성을 떨어뜨린다. 따