전기 영동 결과 Report

결과 제한효소의 반응이 최대로 활성화 되지 않았을 것이고 band 또한 희미하게 나왔을 것이다. 다른 조는 band가 선명하게 나온 경우도 있었기 때문에 두 번째 가설이 더욱 타당성 있다고 보여진다.Experiment – Gel PurificationSubjects전기영동에 의한 유전자 분리Materials Gel purification kit (Bioneer), isopropanolEquipmentBlade, hot block, vortex, table top centrifugePrinciple1. Gel binding buffer – gel을 녹이는 역할을 한다. 2. Washing buffer – agarose를 걸러내고 순수한 DNA만 binding되도

결과 및 결론 (Data and Results)플라스미드 DNA 분리Ⅴ. 고찰 (Discssion)실험에 쓰인 방법은 boiling method 방법인데 이 방법 외에 Alkaline lysis prep, lithium-based procedure 방법으로 실험을 하고 비교해서 어떤 방식으로 분리하는 것이 좋을지 생각해보는 것도 좋을 것 같다.plasmid DNA 분리 실험을 조사하던 중에 가장 대중적으로 쓰이는 방법이 Alkaline lysis prep 방법였다. 이 Alkaline lysis prep 방법에는 3단계가 있는데 그 단계마다 어떤 역할을 하는지 알아보았다. solution Ⅰ

전기영동은 전하를 띤 분자를 전기장에 올려놓고 DNA가 -charge를 띠는 점을 이용하여 반대편에 +charge쪽으로 이동하게 하는 현상을 말한다. DNA는 전하와 크기, 모양 등의 차이 때문에 이동 속도가 다르므로 분리될 수 있다. 대게 아가로즈나 폴리아크릴아마이드를 사용하여 젤을 만들며 전기영동을 할 DNA는 젤 절편에 만든 구멍인 Well에 넣는다. 젤의 농도는 분리하고자 하는 DNA의 크기에 따라 달라지는데 대게 1에서 3%아가로즈나 3에서 20%의 폴리아크릴아

전기영동용 완충용액(running buffer)에 포함된 glycine은 의가약산으로서 음전하와 양전하를 동시에 띨 수 있다. 이와 같은 zwitter이온의 성질을 이용하면 gel내의 pH조건에 따라 glycine의 net charge와 이로 인한 전기영동속도를 조절할 수 있다. 전기영동을 시작하면 leading 이온인 Cl-이온과 SDS에 둘러싸여 있어서 모드 음전하를 띤 단백질, glycine이온이 모두 양극을 향해 출발하게 된다. Glycine의 pI (Net Charge 가 0이 되는 pH)은 대략 6.2 정도이고 따라서 pH6.8의 Stacking ge

전기를 걸어준 후 20-30분 기다린다.4) DNA가 내려오면 자외선 하에서 확인한다.　#　이때, DNA가 내려온 agarose gel을 판에서 분리하여 UV Trans-illuminator에 넣고 시력보호를 위해 반드시 투명판을 내린 후 관찰한다. * TAE ( Tris Acetate EDTA) : DNA 분자량이 큰 경우, agarose electrophoresis에서 쓴다.* TBE ( Tris borate EDTA) : DNA 분자량이 작은 경우, DNA sequencing에 쓴다. 6. 결과- DNA가 전체적으로 음전하를 띠고 있는 것을 이용하여 DNA 단편을 크기별로 분류하는 전기 영동