[생명공학] Plasmid DNA의 isolation 및 Restriction enzyme reaction
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- 목차
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Introduction
Plasmid DNA란?
Plasmid isolation의 원리
Gel Electrophoresis
Restriction enzyme
Material/Method
Plasmid DNA preparation
Gel Electrophoresis
Restriction enzyme reaction
Results
Discussion
- 본문내용
-
Alkaline lysis method
- 세포의 cell wall과 cell membrane을 부수고 DNA만을 분리하는 방법
- Chromosomal DNA 와 plasmid의 고유한 형태 구조 차이를 이용 !
; Chromosomal DNA - 상대적으로 size가 크고, double heilx
Plasmid - size가 작고, supercoiled 형태 -> pH에 변화에 의한 변성↓
Alkaline Lysis Method
DNA gel electrophoresis(전기영동)
- DNA를 size에 따라 분리하는 방법
- DNA는 인산기 때문에 전기영동 buffer 내에서 (-) charge를 띄므로,
전기영동 장치 내 (+)극으로 이동하게 됨
Gel Electrophoresis
DNA gel electrophoresis(전기영동)
- DNA를 size에 따라 분리하는 방법
- DNA는 인산기 때문에 전기영동 buffer 내에서 (-) charge를 띄므로,
전기영동 장치 내 (+)극으로 이동하게 됨
Gel Electrophoresis
DNA running 속도 결정 요인
1) DNA 분자량
2) Agarose gel의 농도(%)
3) DNA 구조
; supercoiled>linear>open circular
4) 전류의 세기
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