Lowry, Kjeldahl 법을 이용한 단백질 정량

정량분석1. 용해도2. 염화마그네슘 3. 실험방법Ⅴ. 조지방의 정량분석1. Soxhlet 추출법(Ether 추출법)의 개념2. 측정 방법1) 시약 및 기구2) 조작3) 계산 및 측정치의 표시3. 방법Ⅵ. 총당의 정량분석1. 재료2. 방법Ⅶ. 질소의 정량분석1. 원리2. Kjeldahl 질소 정량법(중화 적정을 이용한 정량법)3. 계산1) 시료중의 질소량2) 조단백질의 산출4. Macro-Kjeldahl 법5. 계산6. Micro-Kjeldahl법7. 계산Ⅷ. 대두 BBPI(Bowman-Birk protease inhibitor)의 정량분석참고문헌Ⅰ.

< Kjeldahl법에 의한 단백질 정량 >1. 실험목적 : 단백질은 각종 아미노산으로 구성되어 있으며 그 분자 중에는 질소를 함유하고 있는 것이 단백질의 특징 중의 하나. 단백질 중의 질소함량은 식품의 종류에 따라 대체로 일정하므로 kjeldahl법을 이용하여 질소를 정량한 후 단백질량으로 환산하면 식품중의 단백 질량을 알 수 있다2. 실험재료 : Micro Kjeldahl 증류장치, 증류수, H2SO4, 분해촉진제, 시료, 뷰렛, 피펫, 지시약 (0.1% methyl red +0.1% methyl blue (동량), 비등

이용, 식품중의 질소 양을 측정하고, 그 값에 질소계수 6.25(=100/16)를 곱하여 단백질 양을 산출한다. 그러나 식품에 존재하는 질소가 모두 단백질을 구성하는 것이 아니고, 단백질이 아닌 질소화합물(amide 화합물, 암모니아 화합물, purine 염기, creatine 등)도 구성하기 때문에 식품에 존재하는 전체 질소를 정량하고, 여기에 질소계수를 곱하여 얻은 단백질 양은 조단백질(crude protein) 양이라고 한다.질소 정량법으로는 여러 가지 방법이 있지만 Kjeldahl 법이 가

법을 선택하여야 한다.1. Bradford Assay단백질 정량은 생화학의 가장 기본적인 실험중의 하나이다. 단백질 정량법은 다양하지만, 대부분의 실험에서 UV-Vis spectrophotometer가 사용된다. Bradford는 단백질에 발색제를 가하여 가시광선 영역의 흡광도를 측정하는 정량법이다. Coomassie brilliant blue G-250이라고 하는 색소가 단백질의 염기성과 방향족 아미노산 측쇄와 결합하여 그 결과 흡수피크가 465nm부터 595nm로 이동하는 것을 이용하는 방법이다. BCA법과 비교해서

단백질을 정량할 때에는 이와 같은 단백질의 특징을 이용, 식품 중의 질소양을 측정하고 그 값에 질소계수 6.25를 곱하여 단백질 양을 산출한다. (분해 → 증류 → 중화 → 적정)(우리조결과-라면)0.0014×(V0-V1)×F×D×N×100S조단백질(%)=V0 : 12.2V1 : 11.08F : 1D : 250/10=25N : ①6.25, ②5.38S : 3.0009① 8.16%, ②7.62%(성분표-안성탕면)단백질함량 계산11g/125g =8.8%조단백질 정량(Kjeldahl 질소 정량법)원리Mohr법은 전처리한 검체용액을 비커에 넣고 지시약인 크롬산