획선접종법과 주가평판법에 따른 미생물의 순수배양기술
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Abstract : Pure culture is cultivation of a one microorganism. In this experiment, we tested streak plate and pour plate to take a colony. Streak plate was using by loop. The method of pour plate is dilute microorganism and spread in a sollid media. These plates were cultured in 37℃ for 16-18 hour. So, we could gain a colony and count microorganism total count per millilitre.
Key words : pure culture, streak plate, pour plate, incubator, flame sterilization
서 론
미생물 실험에서 가장 중요한 것은 실험대상인 균이 다른 균들에 의해 오염되거나 서로 섞이지 않도록 유지, 보관하는 것이다. 그러나 균은 눈에 보이지 않기 때문에 종종 오염될 수 있는데 이럴 때 원하는 균을 순수하게 분리해내는 방법이 바로 순수배양기법이다(3). 세균의 분리는 고체 생장 배지에서 이루어지며 그 결과 얻어진 집락들은 특정한 성질들을 나타낸다. 본 실험에서는 획선접종법과 주가평판법을 사용하여 세균의 혼합물로부터 순수배양을 얻어 내고자 한다. 획선접종법은 평판을 가로질러 접종이로 연속된 선을 그음으로써 접종이에 붙어있는 세균의 수를 줄여 단일 집락이 형성되게 하는 방법이다(8). 우리는 사분면 획선접종법을 통해 세균을 분리, 배양 하였다. 이 방법을 실시하면 도말 최초의 부분은 많은 수의 미생물에 의해서 연결된 집락을 형성하나 도말한 끝으로 갈수록 독립된 집락이 나타난다(2). 주가평판법은 용액내의 세균수 측정 및 세균의 순수분리에 이용되는 법이다. 미생물의 밀도가 높은 시료를 단계적으로 희석하여 일정량을 평판배지의 표면에 도포하여 배양하는 방법이다. 혼합균체를 액상한천배지로 희석한 후 페트리접시에 주입하여 단일 콜로니를 골라내며, 이때 사용하는 균체 또는 균체 현탁액의 세균의 숫자를 정확히 알지 못하므로 몇 차례 희석 후 페트리접시에 주입하면 하나의 평판배지에 구분 가능한 수만큼의 콜로니를 형성할 수 있기 때문에 단계적인 희석이 필요하다(6).
- 참고문헌
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1. 유민, 김병오, 이혜영. 미생물 실험서. 보문각. p. 25 (2012)
2. 오계헌, 강형일, 소재성, 송홍규, 이병욱. 최신 미생물실험. 신광문화사. p. 70 (2010)
3. 고하영, 이준우. 이론 식품미생물학. 광문각. pp. 223-228 (2005)
4. 서승교, 이웅수. 미생물실험법. 동문각. pp. 7-9, 55-57, 68-69 (2005)
5. 미생물학 실험교재 편찬위원회. 미생물학 실험. 월드 사이언스. pp. 27-28, 30-31 (2000)
6. 유주현, 변유량. 식품 미생물학. 효일. pp. 224-225 (2007)
7. 김영지, 김왕준, 남진식, 배지헌, 손규목, 정승원, 조갑연, 조덕봉, 조석금, 채기수. 식품미생물학. 지구문화사. p. 19 (2007)
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