젓갈로부터의 Lactobacillus plantarum과 Lactobacillus paracasei 분리

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목차
1.Introduction
주제 선정 이유
Target 미생물 설정
2.Main Subject
실험 방법 및 순서
결과 및 고찰
3.Conclusion
본문내용
1) 주제 선정 이유
젓갈은..
- 우리나라의 대표적 수산 발효식품
-어패류의 살, 내장과 알을 약 20%의
소금을 첨가하여 발효시키는 가공식품

단백질 소화효소와 지방 분해효소를 다량 함유
필수 아미노산 (라이신과 트레오닌)을 보충

2) Target 미생물 설정
젓갈에는 일반적으로 내염 또는 호염의 특성을 가진 호기성, 혐기성 bacteria, Lactic acid bacteria, Bacillus 속, Pseudomonas 속, Saccharomyce 속, yeast 등이 존재


발효제품의 품질에 기여
낮은 pH, 우점균이 된 젖산균 자체의 작용,
젖산균이 증식하면서 생성하는 항균성 물질의 염 등으로
부패성 미생물과 세균성 식중독 균의 증식 억제

특히, Lactobacillus plantarum 과
Lactobacillus paracasei 는
모두 항균 활성, 내염성이 우수한 균주로 알려져 있음


Lactobacillus plantarum

포유류나 조류의 장내에 정착해 살며
매우 생명력이 강한 젖산균 종으로,
다량의 항생제 복용 후에도 생존

Vit B1, B2, B3, B5, B6, B12, Vit A and K 생성
short chain of fatty acids 생성
곰팡이나 바이러스 등을 죽이는 바이오신 생성
면역 세포의 수 증강

현재 발효유와 생균제 등에 널리 사용되고 있는
프로바이오틱(Probiotic) 유산균

병원성 미생물의 생육 효과적으로 억제
유기산 생성 능력과 콜레스테롤 흡착 능력 우수
식품, 의약품 등에 광범위하게 사용될 수 있음

1) 실험재료 및 시료 준비
Lactobacilli MRS broth, Agar powder, Nacl,
Bromophenol blue, Bromocresol Purple
Autoclave, Petri dish, 알코올 램프, 에탄올, 도말봉,
백금이, 장갑, 삼각 플라스크, parafilm
Tips, Pipettes, 증류수, incubator, UV spectrometer,
Cuvette, vortex mixer, eppen tube
현미경, 슬라이드 글라스, 커버 글라스

시판중인 굴젓과 낙지젓, 새우젓 마쇄 후
10-1~10-2 수준으로 희석하여 현탁액 제조

2) 고체 배지 만들기
Lactic acid bacteria : 젖당을 이용하여 젖산 생성
이러한 젖산균의 특성을 이용하여
배지에서 노란색을 나타내는 colony만 분리하면
다른 효모, 곰팡이 등으로부터 젖산균 쉽게 분리 가능

BPB배지와 BCP배지가 산성 용액에 반응하여 색깔 변화
지시약을 첨가한 배지에서 균이 성장하는 모습에 따라
미생물 종 파악 가능 (한국바이오벤처협회)

3) Spreading 및 Streaking
4) 전배양 및 본배양

각 젓갈 현탁액을 배지별로 spreading
MRS 배지에 각각 성장한 colony를 streaking
전배양, 본배양 (30℃, 200rpm)
MRS
Lactobacilli MRS broth 2.75g

MRS + Nacl 5%
Lactobacilli MRS broth 2.75g, Nacl 2.5g

MRS + Nacl 10%
Lactobacilli MRS broth 2.75g, Nacl 5g

측정된 OD값으로부터 specific growth rate(μ) 계산
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