바이러스학 실험 결과보고서로 Agarose gel electrophoresis 실험에 대한 결과 보고서입니다.
Agarose gel electrophoresis 실험은 아가로스 겔 전기영동으로 전류를 흘려주면 크기에 따라 분리되는 아가로스 겔을 이용하여 바이러스의 DNA 크기를 확인하는 실험입니다.
본문내용은 실험 목표, 원리, 실험 방법, 결과 사진과 해석, 전기영동의 원리, 아가로스 겔, buffer, 염색시약에 대한 설명, 실험 후 느낀점 등을 포함하고 있습니다.
목차
1. Title
2. Objective
3. Principle
4. Method
5. Result
6. Discussion
7. References
본문내용
1. Title : Agarose gel electrophoresis
2. Objective : 아가로스 겔 전기영동으로 바이러스의 DNA 크기를 확인한다.
3. Principle : 전류를 흘려주면 크기에 따라 분리되는 아가로스 겔을 이용하여 phi-x-174 바이러스의 DNA 크기가 맞는지 확인하였다. phi-x-174 바이러스의 DNA 크기는 5386bp로 만약 이 크기가 맞으면 마커의 위치에 DNA가 표시되어 확인 할 수 있다.
<중 략>
6. Discussion
이번 실험은 아가로스 겔 전기영동을 이용하여 DNA를 크기에 맞게 분리하는 실험을 진행하였다. 망상구조의 반 고형상 지지물질인 겔 형태의 아가로스를 사용한다. 우뭇가사리 등의 해초류에서 정제, 건조한 한천(agar)은 아가로펙틴과 아가로스가 주성분인데, 한천에서 아가로펙틴을 제거한 것이 아가로스이며 이것을 물에 넣어 끓인 다음 굳히면 실험에 사용할 수 있는 아가로스 겔이 된다. DNA는 골격에 인산기(PO4-)를 가지므로 수용액에서 전기적으로 (-) 전하를 띠어 전류를 흘려주면 매질을 타고 (+)극으로 이동하게 된다.
실험에서는 DNA sub-cloning의 첫 단계로서 원하는 유전자를 분리해내는 단계를 수행한다.Digestion of DNA with Restriction EnzymePlasmid로부터 FabG DNA를 절단한다.Agarose Gel ElectrophoresisElectrophoresis를 통해 절단된 FabG DNA와 plasmid를 분리한다.Gel PurificationFabG DNA의 정제Day 2:DNA sub-cloning의 2단계: 얻은 유전자를 cloning vector에 삽입한다. 1단계 실험에서 분리한 유전자를 cloning vector에 넣는다. 이 실험에서 사용하는 cloning vector는 pET-14b로 BamHⅠ와 NdeⅠ의 restriction enzymes으
실험방법- 준비된 DNA 시료를 loading dye와 섞어 gel에 넣는다.- 100v로 40분간 전기영동을 실시한 뒤 UV하에서 DNA band를 확인한다.4. 실험결과Apoptosis가 일어날 때에는 chromatin이 응축되고, DNA fragmentation이 일어나게 되므로 전기영동을 해보면 ladder가 주로 아래쪽에 나오게 되는 반면에, Necrosis에서는 DNA fragmentation이 일어나지 않기 때문에 동일 조건에서 ladder가 더 위쪽에 나타난다. 정확한 밴드를 확인 할 수는 없지만, 위의 그림을 보면 희미한 두 줄의 밴드
electrophoresis 통해 agarose gel 그 어디에도 나타나지 않았다.4. Overall Observations4.1. Result그날 그날의 실험에서 매일 result를 얻는 것이 아니었다. 특히 4번째날의 실험 결과는 그 전까지의 실험의 중간결과에서 크게 잘못되거나 결과가 나타나지 않는 일이 없었는데, 전혀 성공적이지 못한 결과를 얻음으로써, 3~4번째의 날의 실험 과정에서의 문제점이 있지 않나를 유추하게 하였다. 나머지 5번째날의 PCR실험은 실험적인 측면에서 비교적 양호한 결과를 얻었
결과Restriction enzyme 처리정상적인 결과가 나왔다면 plasmid는 제한효소의 작용에 의해 하나의 plasmid 조각이 만들어져야 하고, inserted plasmid는 vector역할을 한 큰 분자량의 plasmid한 조각과 foreign gene역할을 한 작은 분자량의 DNA조각이 만들어 져야 한다. 실험의 결과는 전기영동을 통해 알 수 있다. plasmid의 경우 한 개의 band가, inserted plasmid의 경우 두 개의 band가 나오면 성공이다Gel electrophoresis (FabG DNA insert 와 pET-14b vector 확인)plasmid와 inserted plasmid를 각각 load
저작권 관련 사항 정보 및 게시물 내용의 진실성에 대하여 레포트샵은 보증하지 아니하며, 해당 정보 및 게시물의 저작권과 기타 법적 책임은 자료 등록자에게 있습니다. 위 정보 및 게시물 내용의 불법적 이용, 무단 전재·배포는 금지됩니다. 저작권침해, 명예훼손 등 분쟁요소 발견시 고객센터에 신고해 주시기 바랍니다.
등록일 / 수정일
hwp (아래아한글2002)
1
2
3
4
5
