일반생물학 실험 - Restriction Enzyme Digestion

DNA분자가 생성되었음을 알 수 있다. Date Experiment – Digestion of DNA with Restriction Enzyme Experiment – Agarose Gel Electrophoresis Experiment – Gel Purification Date Experiment - Ligation reaction Experiment – Preparing competent bacteria & Heat shock transformation Date Subjects Experiment – Selection of Tranformants Date Experiment – Protocol for plasmid preparation Experiment – 제한효소에 의한 유전자의 분리 Experiment – 전기영동에 의한 유전자의 분리 Date  Subjects

Digestion of DNA with Restriction EnzymeMaterials: plasmid, DDW, restriction enzyme (Nde I, BamH I), restriction enzyme reaction bufferEquipments: water bath, brief centrifuge① Plasmid only와 DNA Inserted plasmid를 다른 tube에 5㎕l씩 넣는다.DDW 2㎕, 10ⅹreaction Buffer는 1㎕씩 넣는다.Restriction enzyme BamH1과 Nde1을 각각 1㎕ 넣는다. Total Volume은 10㎕가 된다.*위와 같은 혼합물을 시험관에 넣을 때에는 보통 enzyme을 가장 마지막에 넣는 것이 좋다.* 효소 원액에는 glycerol이 들어있기 때문에 점도가 높아서 pip

실험군에서 뽑는 DNA양도 같아야 한다. 그래서 cell수를 세어서 해야 한다는데, 그 수행여부는 우리가 알 수 없었다. ◈ 느낀점눈으로 보이지 않는 과정을 실험을 통해서 확인 한다는 것은 정말 새로운 경험이 되었다. 책이나 미디어를 통해서 접할 수 있는 내용을 내가 직접 해볼 수 있다는 것 또한 정말 새롭게 다가왔다. 일반 미생물 실습 때와는 다르게 화기애애한 실험분위기가 좋았다. 특히 단순 미생물을 배양하는 것이 아니라 그 미생물의 gene을 이

생물학 실습도 일반미생물학 실습과 비슷하겠지 라는 생각을 하고 실습을 시작했지만 약간 성격이 다른 실험이었다. 일반미생물학 실습과는 달리 더 작은 용량의 reagent와 solution을 가지고 DNA, restriction enzyme과 같이 bacteria보다 더 작은 bacteria안에 존재하는 cellular component를 다루는 실험이었다. 그리고 작은 cellular component를 다루는 만큼 들어가는 solution과 reagent, buffer의 양도 1~5 마이크로리터 정도였다.보이지도 않는 cellular component인 DNA를 인간이 restrictio

실험에서 쓰인 BamH1과 EcoRV 모두 sticky end로 자릅니다. 14151617Sol1, Sol2, Sol3 넣고 생기는 변화 그림으로 설명18Sol1, Sol2, Sol3 넣고 생기는 변화 그림으로 설명1920에탄올은 세균의 펩티도글라이층을 뚫고 들어가서 단백질을 응고시킴으로써 살균을 하게 됩니다. 이때 100% 에탄올의 경우는 응고능력은 뛰어나나 세균 표면서부터 순간적인 응고가 일어나므로 막을 형성시키게 됩니다. 결국 그 막에의해 에탄올이 균체내부까지는 침투하지 못하여 살균력