[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법, SDS-PAGE 분석, Western Blot

  • 등록일 / 수정일
  • 페이지 / 형식
  • 자료평가
  • 구매가격
  • 2017.03.17 / 2017.03.17
  • 12페이지 / fileicon hwp (아래아한글2002)
  • 평가한 분이 없습니다. (구매금액의 3%지급)
  • 2,000원
다운로드장바구니
Naver Naver로그인 Kakao Kakao로그인
최대 20페이지까지 미리보기 서비스를 제공합니다.
자료평가하면 구매금액의 3%지급!
이전큰이미지 다음큰이미지
하고 싶은 말
열심히 작성하고 좋은 평가를 받은 자료입니다.
본문내용
1. 제목 : 단백질 정량 분석 – BCA법 & SDS-PAGE 분석 & Western Blot

2. 실험 목적
: BCA Method를 이용하여 우유 중의 단백질 함량을 분석하고 SDS-PAGE와 Coomassie Blue 염색을 통해 단백질의 전기영동 결과를 관찰한 것을 바탕으로 Western Blot을 시행하여 membrane에 transfer시켜, 항원-항체 반응을 이용하여 특정한 단백질의 정량 분석과 검출하는 방법을 실험을 통해 숙지한다.

3. 이론
Ⅰ. 단백질 정량법
1) BCA(Bicinchoninic Acid) 법
- 단백질이 구리 이온(Cu2+, Cu1+)을 환원 (Reduction) 시킬 수 있는 성질을 이용

Fig 1. BCA 원리 모식도
- 단백질에 의해 환원된 구리 이온은 BCA용액과 반응을 해서 보라 빛의 화합물을 생성
- 이 화합물은 빛의 특정 영역(562nm)에서 구리 이온이 담긴 용액과 BCA용액 각각보다 빛의 흡수율이 높기에, spectrophotometer를 사용해서 측정하면 흡수율 차이를 측정할 수 있다.
- 단백질의 양이 많으면 보다 많은 보라빛 화합물이 생성 → 그 화합물은 빛을 더 많이 흡수. 즉 흡수율이 증가 → 그것에 비례해서 Sample에 있는 단백질 양을 결정
참고문헌
http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=610442&cid=42420&categoryId=42420
http://biotechnology.tistory.com/21
http://blog.naver.com/redplatypus/40001508802
http://blog.naver.com/shung78/130031545514
http://www.elpisbio.com/sub/support/protocols/SDS-PAGE-gel.htm
http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=431735&cid=42411&categoryId=42411
http://en.wikipedia.org/wiki/Glycine
http://100.naver.com/100.nhn?docid=828536 (monoclonal/polyclonal antibody)
http://en.wikipedia.org/wiki/Nitrocellulose
http://en.wikipedia.org/wiki/Polysorbate_20
http://en.wikipedia.org/wiki/Horseradish_peroxidase
정지은, Tech Note-Western blot, 서린바이오사이언스, 2012, pp. 1-11
이승택, 2013-1 단백질 정량 강의자료, 연세대학교 생화학과, 2013, pp.1-16.
자료평가
    아직 평가한 내용이 없습니다.
회원 추천자료
  • 생화학 실험 중요 포인트 요약 노트
  • 정량하는 방법이다. 이러한 방법의 이해를 위해서는 먼저 Amino Acid의 산 - 염기적 성질들을 알아야 하며 Amino Acid Titration 을 통해 각각의 Amino Acid 들의 고유한 산 - 염기적 성질 (pK,Isoelectric Point 등) 을 알수 있다.Protein 정량분석 (뷰렛법/로우리법)가. Protein 정량의 개요Protein을 Hydrolysis시키면 Peptide bond가 끊어지면서 Amino Acid가 유리된다. 보통 Peptide나 단백질을 6N HCl 용액이 들어있는 시험관에서 공기를 제거하고 밀봉한 후 100 °C 에서 8 - 24 시간 동안 가

  • 생화학 실험 요약 노트
  • 정량하는 방법이다. 이러한 방법의 이해를 위해서는 먼저 Amino Acid의 산 - 염기적 성질들을 알아야 하며 Amino Acid Titration 을 통해 각각의 Amino Acid 들의 고유한 산 - 염기적 성질 (pK,Isoelectric Point 등) 을 알수 있다.Protein 정량분석 (뷰렛법/로우리법)가. Protein 정량의 개요Protein을 Hydrolysis시키면 Peptide bond가 끊어지면서 Amino Acid가 유리된다. 보통 Peptide나 단백질을 6N HCl 용액이 들어있는 시험관에서 공기를 제거하고 밀봉한 후 100 °C 에서 8 - 24 시간 동안 가

  • 영양생화학 실험 - SDS-PAGE에 의한 단백질 분리와 Western Blotting
  • 1:1000dmfh 희석한다. (보통 단백질은 1:1000)13. 암실에서는 핸드폰 불빛을 키지 않도록 한다.실험결과◆ actin 단백질고찰• 단백질이 안나올수 있는 이유는 1.해당 단백질이 안들어있다, 2. 2차 antibody가 충분하지 않았다 의 이유인데 이번 실험에서는 우리조가 쓰는 actin 단백질은 기본이 되는 단백질이어서 잘 나온다고 했었고 2차 antibody도 충분했던 것 같다.• 이렇게 단백질이 정확하게 나왔다는 것은 actin 단백질을 정확하게 정량했다는 뜻이다.

  • [영양학] 간암 환자의 혈청 내 셀레늄(Selenium)농도에 관한 연구
  • 실험(체외시험관실험)에서 알려진 것처럼 SeMet(Selenomethionine)에 의해 TRX의 발현이 높아진다는 사실을 확인해 보기위하여 *western blot실시② 셀레늄의 세포보호효과를 알아보기 위하여 파라핀 절편에 의한 쥐의 간조직 관찰 실시*western blot : (생화학)특수 단백질 검출 검사나. 연구방법 ① 실험동물의 사육 ② 실험군 분류 및 셀레늄 투여 ③ 방사선 조사 ④ 실험동물의 처리 ⑤ Western blot 분석 ⑥ 파라핀 절편 관찰 다. 연구결과① Western blot의 결

  • [생화학실험2]Western blot analysis using His-tag Antibody
  • 법으로 그 방법이 간단하고 비용이 많이 들지 않으며 다량 분석이 가능해 현재 가장 널리 쓰이고 있는 antigen-antibody 분석법의 하나이다. 특히 이 방법은 방사능 면역 시험법(Radio Immuno Assay)과 같이 매우 민감한 반응이면서 RIA에서처럼 방사능을 사용하지 않는다는 이점이 있어서 그 사용이 증가되고 있다. detection하는 것이 목적인 western blotting과는 달리 이것은 antibody 를 이용해서 antigen 이나 protein 을 detection 하고 그 양을 quantify 하는 것이 목적이다. 예를

오늘 본 자료 더보기
  • 오늘 본 자료가 없습니다.
  • 저작권 관련 사항 정보 및 게시물 내용의 진실성에 대하여 레포트샵은 보증하지 아니하며, 해당 정보 및 게시물의 저작권과 기타 법적 책임은 자료 등록자에게 있습니다. 위 정보 및 게시물 내용의 불법적 이용, 무단 전재·배포는 금지됩니다. 저작권침해, 명예훼손 등 분쟁요소 발견시 고객센터에 신고해 주시기 바랍니다.
    사업자등록번호 220-06-55095 대표.신현웅 주소.서울시 서초구 방배로10길 18, 402호 대표전화.02-539-9392
    개인정보책임자.박정아 통신판매업신고번호 제2017-서울서초-1806호 이메일 help@reportshop.co.kr
    copyright (c) 2003 reoprtshop. steel All reserved.