일반생물학 - DNA 추출 및 PCR & PCR 결과 확인(전기영동)

DNA분자들을 양 cDNA의 말단에 박테리오파지 T4에서 유래한 DNA결합 효소를 이용해 연결시킨다(7). 이 결합 효소는 점착성 말단이 아닌 ‘평활 말단’의 이중 가닥 DNA분자를 결합시킨다. 그러나 결합된 분자들은 다시 제한 효소로 처리하면 결과적으로 점착성 말단을 가진 cDNA분자가 만들어지게 된다. 3. PCR중합효소 연쇄 반응(Polymerase Chain Reaction, PCR)은 DNA의 원하는 부분을 복제증폭시키는 분자생물학적인 기술이다. 이 기술은 사람의 게놈과 같은 매우

추출해낸 DNA를 제한 효소를 사용하여 여러 개의 DNA 조각으로 분리한 후, 전기영동을 통하여 원하는 DNA 분자가 유입되었는지를 확인한다. 2. 배경 이론효소공급원인식 서열잘린 모습EcoRI Escherichia coli5GAATTC3CTTAAG5-G AATTC-33-CTTAA G-5PstI45Providencia stuartii5CTGCAG3GACGTC5-CTGCA G-33-G ACGTC-5이번 실험에는 DNA를 제한 효소로 절단하는 과정이 포함되어 있다. 제한 효소는 원래 세균이 침투한 외래 DNA를 변형 및 파괴시키기 위하여 존재하

PCR을 위한 시료와 DNA 추출액을 제출한다.일반생물 제13주실험 제목: PCR 결과 확인 (전기영동)Ⅰ. 실험 목적(Purpose of experiment)지난 11주차에 추출한 DNA의 PCR결과를 전기영동을 통해 확인한다.Ⅱ. 배경지식(Background knowledge)1. PCR(polymerase chain reaction)PCR은 1980년대 중반에 Kary Mullis에 의해 개발된 것으로 특정염기서열을 증폭함으로써 DNA 염기서열 분석 및 현대 분자생물학의 발전을 가져왔다. PCR 방법에 가장 흔히 사용되는 DNA 중합효소는 Taq 1 polymerase이다

전기영동(agarose gel electrophoresis)에 의한 유전자의 분리a. Agarose gel 전기영동 시 DNA의 이동에 영향을 주는 요인들로는 DNA의 분자의 크기, Agarose의 농도, DNA 형태에 따라 이동속도가 다르다. 또 전압이 높을수록 전기장의 방향, Ethidium bromide, 전기영동 buffer의 성분과 이온의 강도도 전기영동 속도에 영향을 준다.b. DNA loading bufferAgatose gel의 well에 DNA를 넣어 줄 때, DNA 용액을 넣어 줄 때, DNA 용액을 무겁게 하여 agarose의 홈으로 가라 앉히는 역할을 하며, 그 성

전기영동(PFGE : pulsed field gel electrophoresis) 1984년 기술이 나왔고 또한 같은 수준의 크기 DNA를 클론화 할 수 있는 벡터로써 효모인공염색체(YAC)도 개발되었다. 이것이라면 단순히 클론의 길이를 계산하면 35개로써 21번 염색체의 전체길이를 커버할 수 있다는 것이다. 잘린 곳이 없는 콘틱을 만들기 위해서는 전체길이의 몇 배나 되는 DNA 클론을 모아야 할 필요가 있으나 10배이라도 350개이므로 현실적으로 가능한수준이다. 이와 관련해서 PFGE는 일반적인 전