[식품 분석 및 실습] 단백질 정량

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목차
Protein Quantity Method

Absorbance at 280nm(A280)
1. 정량 원리
2. 실험 결과

Lowry assay
1. 정량 원리
2. 장 점
3. 단 점
4. 실험 과정에서 sample 및 BSA의 dilution 배율과 총 volume
5. 실험 결과 및 Discussion

Bradford assay
1. 정량 원리
2. 장 점
3. 단 점
4. 실험 과정에서 sample 및 BSA의 dilution 배율과 총 volume
5. 실험 결과 및 Discussion

BCA assay
1. 정량 원리
2. 장 점
3. 단 점
4. 실험 과정에서 sample 및 BSA의 dilution 배율과 총 volume
5. 실험 결과 및 Discussion

혈액의 cholesterol 측정
1. 실험 과정에서 sample 및 BSA의 dilution 배율과 총 volume
2. 실험 결과 및 Discussion

회분정량
1. 정량 원리
2. 실험 결과 및 Discussion
본문내용
Protein Quantity Method
◈ 단백질을 정량하는데 이용하는 spectroscopic 방법
à 단백질의 UV흡수에 따른 측정법
à Lowry assay
à Bradford dye assay
à the Smith copper/bicinchoninic assay(BCA assay)
☞ Lowry assay, Bradford assay, BCA assay는 단백질에 따른
색변화를 일으킨다.

Absorbance at 280nm(A280)
1. 정량 원리
단백질에 있는 티로신, 페닐알라닌 및 트립토판 잔기들은 각각 275nm와 280nm의 자외선을 흡수한다. 많은 단백질들에 있어서의 이 아미노산들의 합친 수준은 거의 일정하므로 단백질의 농도는 280nm에서의 흡광도와 비례하게 된다. 물론 예외가 있기는 하지만 순수한 단백질의 경우 단백질의 농도가 1mg/ml이고 자외선이 통과하는 경로가 1cm일 때 280nm에서의 흡광도는 1.0이다. 따라서 대부분의 순수한 단백질의 농도는 280nm에서의 흡광도를 측정함으로써 신속히 결정할 수 있다. 이 방법은 정량하는 데 시간이 적게 들 뿐만 아니라 정량하고 난 후의 단백질을 완전히 회수하여 재이용할 수 있는 이점이 있다. 유감스럽게도 자연물들에는 280nm에서 흡광을 나타내는 그밖의 화합물들이 많이 있다. 특히 핵산은 260nm에서 최대 흡수를 가지고 있지만 280nm에서도 흡광도가 상당히 크다. 그러 A280/A260을 알면 280nm에서의 핵산의 흡광에 대한 보정을 할 수 있다.
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  • 각 방법에 대해 자세하게 설명이 되있어요.
  • 0411***
    (2009.12.17 14:34:51)
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