NAA 처리 유무에 따른 Arabidopsis의 IAA19 gene expression 분석
- 등록일 / 수정일
- 페이지 / 형식
- 자료평가
- 구매가격
- 2015.07.25 / 2015.07.25
- 8페이지 / docx (MS워드 2007이상)
- 평가한 분이 없습니다. (구매금액의 3%지급)
- 2,000원
최대 20페이지까지 미리보기 서비스를 제공합니다.
자료평가하면 구매금액의 3%지급!
1
2
3
4
5
6
7
8
추천 연관자료
- 하고 싶은 말
- 참고자료로 활용하셔서 좋은 결과 있기를 바랍니다.
- 본문내용
-
실험목적
옥신은 식물 생장과 발달의 많은 측면을 조절한다. 옥신은 AUX/IAA protein의 분해를 통해 유전자 발현을 조절한다고 알려져 있다. AUX/IAA protein은 SCF^TIR1 으로 알려진 유비퀴틴 리가아제의 작용을 통해 분해되는 유전자 전사를 조절하는 repressor이고, 옥신은 AUX/IAA 단백질의 분해 속도를 빠르게 조정하는 역할을 한다. E3와 proteasome에 의해 AUX/IAA protein이 분해됨에 따라 IAA19를 포함한 auxin responsive genes가 발현될 수 있게 된다. 이번 실험에서는 NAA를 처리한 Arabidopsis와 NAA를 처리하지 않은 Arabidopsis의 tissue에서 각각 RNA를 분리하여 cDNA를 합성하고, PCR을 진행하여 두 식물체에서 Auxin signaling gene인 IAA19의 발현량이 차이가 있는지 실험적으로 확인해보았다.
실험 방법
첫 주에는 RT-PCR에 사용할 cDNA를 만들기 위해 우선 NAA를 처리한 Arabidopsis와 NAA를 처리하지 않은 Arabidopsis의 RNA를 preparation하는 실험을 하였다. 우선 tube에 담긴 sample을 액체 질소로 얼린 후 즉시 갈아주는 작업을 7번 반복하였다. 이 때 세포 안의 RNase에 의해 RNA가 분해되지 않도록 sample이 녹지 않도록 시간을 지체하지 않도록 하였다. 그리고 sample이 들어있는 tube에 450ul의 RLT buf를 넣고 살짝 흔들어 주고 10분 정도 incubation을 하였다. 세포 내에 존재하는 cell debris를 제거하기 위해 보라색을 띤 Lilac spin column에 buffer를 옮긴 후에 13,000rpm에서 약 2분 동안 centrifugation을 해주었다. 그리고 상층액을 새로운 tube에 옮겼다. 200ul의 에탄올 용액을 넣은 후에 pink spin column에 용액을 옮겨주었다. 그 후에 700ul RW1 buffer용액을 넣고 15초 동안 10,000rpm으로 원심분리를 하였다. 그리고 500ul RPE buffer를 넣고 10,000rpm에서 15초간 spin-down해 주었다. 그 후 500ul RPE buffer를 넣고 2분 동안 10,000rpm에서 spin-down 해주었다. Collection tube를 빈 상태로 13,000rpm으로 1분간 spin down 해주었다. 그 후에 10,000rpm에서 1분간 30ul의 Rnase-free water를 넣고 spin-down 해주었다.
- 참고문헌
-
Nihal Dharmasiri & Mark Estelle, 「Auxin signaling and regulated protein degradation」, p.1
Nathan Zenser 외, 「Auxin modulates the degradation rate of Aux/IAA proteins」, p.1
http://www.ehydroponics.com/blog/more-about-plant-growth-regulators
http://plantbiotechinfo.blogspot.com/2011/10/auxins.html
http://users.ugent.be/~pdebergh/pri/pri4et03.htm
Klaus Grossmann, 「Auxin herbicides:current status of mechanism and mode of action」, p.1
http://www.ehow.com/list_6310636_plant-affect-root-growth-results.html
http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/A/Auxin.html
John Brennan, 「How Are Synthetic Auxins Used As Herbicides?」, eHow Contributor
http://www.agron.iastate.edu/courses/Agron317/Synthetic_auxins.htm
Jason W. Reed, 「Roles and activities of Aux/IAA proteins in Arabidopsis」, pp.1-2
Kiyoshi Tatematsu, 「MASSUGU2 Encodes Aux/IAA19, an Auxin-Regulated Protein That Functions Together with the Transcriptional Activator NPH4/ARF7 to Regulate Differential Growth Responses of Hypocotyl and Formation of Lateral Roots inArabidopsis thaliana」, p.1
Kate A. Drehera, Jessica Brownb, Robert E. Sawb and Judy Callis, 「The Arabidopsis Aux/IAA Protein Family Has Diversified in Degradation and Auxin Responsiveness」, p.1
강영희, 『생명과학대사전』, 2008
http://www.kdr.co.kr
Kiyoshi Tatematsu, 「MASSUGU2 Encodes Aux/IAA19, an Auxin-Regulated Protein That Functions Together with the Transcriptional Activator NPH4/ARF7 to Regulate Differential Growth Responses of Hypocotyl and Formation of Lateral Roots inArabidopsis thaliana」, p.1
S.Hughes & A.Moody, 『PCR』, Scion, P.6
Ibid., p.19
Ibid., pp24~25
Ibid., p.17
Ibid., pp.17-19
Ibid., p.41
http://www.premierbiosoft.com/tech_notes/PCR_Primer_Design.html
Ibid., p.17
http://www.premierbiosoft.com/tech_notes/PCR_Primer_Design.html
자료평가
-
아직 평가한 내용이 없습니다.
회원 추천자료
- [식물분자생리학] Connecting Several External Stimuli Through a Mitogen Activated Protein Kinase Cascade
- [식물생리학]애기장대 DNA추출과 전기영동
- [형질][형질개량][출아형질][형질전환][형질전환동물]형질과 형질개량, 형질과 출아형질, 형질과 형질전환, 형질과 형질전환동물, 형질과 생산형질, 형질과 유전력, 형질과 RFLP(제한효소단편길이다형성) 분석
- 증후군의 정의 및 종류, 원인, 증상, 대책, 최근 연구동향을 통한 나의 의견 정리
- Cell protective effect of Chromium in INS-1 cell to glucotoxicity
오늘 본 자료
더보기
최근 판매 자료
- [창의공학] 계단 오르는 유모차 문제점 및 해결방안
- 모발 염색의 종류와 원리
- [조경실무]조경실무 - 도시경관의 문제점과 발전방향
- 바이오인포매틱스(생물정보학)개념, 바이오인포매틱스(생물정보학)정보과학적기법, 바이오인포매틱스(생물정보학)현황, 바이오인포매틱스 과제
- [생물학] 유전자와 돌연변이
- 디지털 회로 실험 및 설계 - ADC(Analog to Digital Converter) 실험 1
- 회로이론1 이정훈 년도 표기
- 회로이론1 이정훈 년도 표기 X
- 연세대 고려대 성균관대 한양대 기계공학 대학원 구술면접자료 및 공부
- 전자기학 응용예제_04장 hayt
저작권 관련 사항 정보 및 게시물 내용의 진실성에 대하여 레포트샵은 보증하지 아니하며, 해당 정보 및 게시물의 저작권과 기타 법적 책임은 자료 등록자에게 있습니다. 위 정보 및 게시물 내용의 불법적 이용, 무단 전재·배포는 금지됩니다. 저작권침해, 명예훼손 등 분쟁요소 발견시 고객센터에 신고해 주시기 바랍니다.