Tisuue_Prosessing 레포트
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- 목차
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Tisuue Prosessing
*Section*
<Microtome>
<Cryotome> or <Frozen section>
Staining
H&E Stain
① 탈 파라핀 과정 : Xylene5분→ Xylene5분(1, 2)
② 함수(hydration) : 100%→ 90%→ 80%→ 70%ETOH(3, 4, 5)
③ 염색(퇴행성)
④ 탈수 투명 과정 70%→ 80%→ 90%→ 100%
⑤ Mounting(봉입)
Masson's Trichrome method
Solution
Staining procedure
Results
Embedding
=포매(블럭 만드는 과정)
- 본문내용
-
→ 동물실에서 적출한 sample을 10% 포르말린(Formalin)에 넣고 약 하루동안 담궈 놓는다.
(10% 포르말린 = 실제로는 4%이다. 왜냐하면 용기에 담겨있는 포르말린이 40%인데 이것을 100%로 가정하고 10배 dilution해서 쓰기 때문이다.)
→ Cassete에 Labeling을 하고 그 안에 sample을 넣은 후 미리 준비해놓은 사각용기(add D.W나 포르말린)에 Cassete를 넣는다.
→ 후에 Tisuue Prossesor를 12h정도 돌린다.
*Section*
<Microtome>
일반 근육 조직이 깎기 편하고 혈액, 뼈 등을 깎기 힘들 때 Hcl 1:1로 뿌려주면 좋다. (Hcl= 탈 칼슘작업이기 때문에 뼈가 아니면 사용x)
→ 깎은 smaple을 ETOH와 물을 섞은 용액에 담근다. (이때는 반쯤 말려있는데 두 번째 용기(45℃)에 말려있는 상태로 넣게되면 안펴질 경우가 있어 조직부분은 다 펴져있어야 한다.)
→ 슬라이드(slide)로 떠서 두 번째 용기(45℃)에 넣으면 펴진다.
→ 슬라이드(slide)를 뺀 후 세워서 물기를 빼준다.
Stain start (만약 바로 staing을 안하려면 이전 과정에서 파라핀을 녹이지 않고 보관하면 된다.)
→ hot block(60-65℃)에 슬라이드(slide)를 올려서 파라핀(paraffin)을 녹여준다.
→ 파라핀(paraffin)을 제거하기 위해 Xylene에 담근다.
→ Xylene을 제거하기 위해 ETOH에 담근다.
→ ETOH을 제거하기 위해 물에 담근다.
----------------------------Stain----------------------------
→ 물을 제거하기 위해 ETOH에 담근다.
→ ETOH을 제거하기 위해 Xylene에 담근다.
-------------------------Mounting block------------------------
→ 현미경으로 사진 or 렉에 꽂아 보관한다.
<Cryotome> or <Frozen section>
= 급속냉각 (수술실과 같이 빠르게 봐야 할때)
= 이용이 간단하나 저장이 용이하지 x
Tissue-Tek
(O.C.T Compound) Optimal Cutting Temperature 용액을 넣어서 급속 냉각한다.
* 상온에서는 녹음.
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