적혈구 막을 통한 물질이동& 혈구계산
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- 목차
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1. 적혈구 막을 통한 물질이동
실험 1. 적혈구 표준곡선의 작성
실험 2. 시간에 따른 용혈 정도 측정
실험 3. 적혈구 용혈곡선 작성
실험 4. 용질에 따른 적혈구 막의 취약성
A) 분자 크기에 따른 용혈 여부
B)지질 용해도에 따른 용혈 속도 비교
C) 등삼투성이 아닌 용액에 노출 되었을 때의 효과
실험 5. 적혈구 삼투성
추가 실험
A) 극성 용매에 따른 용혈 시간
B) CCB가 막에 미치는 영향
2. 혈구계산 실험
3. 참고문헌
- 본문내용
-
표준색과 표준곡선의 작성
실험방법
1) 시험관에 증류수 10ml와 적혈구 부유액 0.1m를 첨가한 후 잘 흔들어 준 다음 시험관 대 위에서 5분간 방치한다. 이후 이를 3000rpm에서 3분간 원심분리한다. 이런 과정을 통해 얻은 상층액이 100%용혈 표준색 용액이다.
2) 위의 (1)에서 얻은 용액 5ml를 두번째 시험관에 옮긴 후 증류수 5ml를 첨가하여 잘 혼합해준다.(50% 표준색 용액)
3) 이번에는 50% 표준색 용액 5ml를 세번째 시험관에 넣은 후 역시 증류수 5ml를 첨가하여 잘 혼합해준다. (25% 표준색 용액)
4) 위와 같은 요령으로 만든 100%, 75%, 50%, 25%, 12.5% 표준색 용액의 흡광도를 분광광도계의 파장을 560nm로 고정한 상태에서 측정하고, 이를 이용하여 표준곡선을 작성한다.
(중략)
A) 분자 크기에 따른 용혈 여부
각각 적혈구 부유액 0.05 ml를 넣고 5분간
방치하면서 용혈이 일어나는 시간을 기록
증류수 5 ml
0.3 M urea 용액 5 ml
0.3 M glycerol 용액 5 ml
0.3 M glucose 용액 5 ml
0.3 M sucrose 용액 5 ml
A) 분자 크기에 따른 용혈 여부 및 용혈의 종류
① 삼투성 용혈
RBC가 hypotonic solution에 있어, 물이 세포 내로 들어가
부피가 변화하여 세포내의 헤모글로빈이 밖으로 빠져나감으로
일어나는 용혈
② 이차적 삼투성 용혈
Isosmotic solution이라도 용질이 RBC로 확산될 때 물의
이동도 수반되어 일어난 용혈
③ 비삼투성 용혈
세포막 투과도를 증가시키는 물질에 의해 일어나는 용혈
- 참고문헌
-
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(2016.10.18 16:09:36)
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