단백질 분리정제

분리정제표효소시료부피(ml)단백질농도(mg/ml)전체단백질양(mg)효소활성(mlU/l)전체효소활성(mlU)비활성(specificactivity)정제배수쇄균액x10206.138 122.759 19736.246 394.725 3.215 1.000 투석액x102.32.026 4.660 86452.023 198.840 42.673 13.271 DEAE-셀룰로스크로마토그래피20.172 0.344 749.130 1.498 4.350 1.353 20mM 140.218 0.871 8048.272 32.193 36.977 11.500 Tris-Cl 세척액240.192 0.768 55.374 0.221 0.288 0.090 340.227 0.907 139.970 0.560 0.617 0.192 440.197 0.786 123.503

분리 및 정제법 이 개발되고 있다. ○ 국내기업의 경우, CJ는 라이신 생산수율을 Ajinomoto와 비슷한 65%까지 높인 균주를 개발했고, 백광화학(전 BASF Korea)은 삼투압내성 변이주를 유가배양해 라이신 축적량을 130g/L(대당수율 48.6%)까지 향상시킨 것으로 보인다. 이 밖에 한국공개특허 10-2009-0084099호는 디아미노피멜레이트 탈수소효소가 증가된 변이주(KFCC10881-ddhP1)로 라이신을 3% 증산(대당수율 44%)한 것으로 보고하고 있다. ○ 당밀은 아미노산공업에서 사용

단백질 분리 정제 실습 보고서Principle:Signal transduction60조개가 넘는 세포를 가진 인간과 같은 다세포 생명체들은 1개의 수정 세포에서 증식과 분화과정을 통하여 생성된 많은 종류의 세포 공동체들로 구성되어 있다. 세포 외부에서 특이적인 신호(signal)나 변화가 일어나면 세포막에 존재하는 특별한 수용체가 이를 인지하여 세포 내 단백질들에게 일련의 체계적이고 역동적인 변화를 일으키며, 이들이 조합되어 신호전달 물질의 분비, 유전자 발현, 세

목적 RFP 유전자가 원하는 cell에 잘 들어간 것을 확인한 상태에서, RFP-GST 단백질을 여러가지 조건을 달리하며 분리, 정제해보고 조건에 대한 의미와 단백질 발현량에 대해 생각해본다.이론glutathione S-transferase : EC 2.5.1.18. 알킬, 방향족할로겐화합물,에폭시화합물, 퀴논화합물 등 많은 소수성 구전자화합물에 대한 환원형 글루타티온에 의한 구핵반응을 촉매하여 티오에테르결합을 통한 글루타티온포합체를 형성하는 효소의 총칭. 지질, 핵산 과산화물을

단백질 분리 및 정제Sample Preparation Principle:Extraction Buffer(=lysis buffer) : Tris, TritonX-100, NP-40, SDS 등 여러 가지 detergent들이 cell wall과 mitochondria membrane을 깨트려주고 아래의 표에 제시된 protease inhibitors들이 세포 안의 protease가 단백질을 분해하는 것을 막아준다. 추가적으로 phosphatase inhibitor를 넣어 우리가 확인하려는 pERK의 activation 상태를 유지시킨다.Procedure:쥐의 아세포에서 추출한 NIG-3T3 cell을 growing condition(10% Calf serum/ DMEM, 5% CO2, 36.5℃)에서 배