[전염병학] 병원성 세균의 동정

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2010.03.31 / 2019.12.24
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목차: Introduction

I. 병원체 진단 실습

II. 배지의 종류

III. Gram stain 의 방법

IV. Vitek card

V. Antibiotic susceptibility test

Methods

I. 배지 준비

II. 세균 배양

III. 확인 culture

IV. 예비 culture

VII. 추가 실험(예비 culture부터 다시 함)

Discussion

Conclusion

본문내용: III. Gram stain 의 방법
도말,고정시킨 슬라이드에 crystal violet을 가하여 90초간 염색한다.
수돗물로 서서히 염색약을 씻어낸다.
매염제인 iodine 용액을 가하여 1분간 처리한다.
Iodine을 수돗물로 씻어낸다.
30초간 95% 알코올로 탈색시킨다.
수돗물로 알코올을 씻어낸다.
Safranin으로 45초간 대조 염색한다.
수돗물로 safranin을 씻어낸다.
여분의 수분을 말린 후 검경한다.

IV. Vitek card
a. 용도
미생물 신속동정 및 항생제 감수성 검사장치
b. 원리
30개 well에 건조된 시약이나 항생제가 들어있는 작고 얇은 카드로서 포함된 시약 외에 기타 추가 시약이 필요 없으며, 각 카드 타입이 바코드로 인쇄되어 있어 reader 에서 자동으로 인지 가능
c. 방법
- 해당 카드에 코드 및 필요사항을 표기한다.
- 시료액을 준비한다.
- 기기에서 시료액 Filling 및 Sealing을 행한다.
- 분석기기에 넣고, 프로그램 실행시킨다.
- 자료 출력
d. 특징
- 2-13시간이내에 균 동정 가능
- 균액주입, 배양과 판독이 동시에 이루어지는 전자동화 장비
- 전처리 과정이 비교적 간단
- Card에 따라 database가 다소 부족
- ANI card의 경우 자동화의 의미가 없음
V. Antibiotic susceptibility test
a. 의의
특정 병원성균에 대한 항균제의 효과를 측정하여 임상에서 적당한 항균제를 선택할수 있도록 함
b. 종류
액체배지 희석법(broth dilution method)
최소억제농도(Minimal Inhibitory Concentration, MIC)뿐 아니라 최소살균농도 (Minimal Bactericidal Concentration, MBC)도 측정가능. 그러나 집락의 증식 상 태를 눈으로 확인할 수 없기 때문에 다른 세균에 의한 오염을 배제할 수 없다. Microscan, Vitek 등 자동화된 장비는 microbroth 희석법으로 균주의 MIC를 측정 하며, 많은 미생물 검사실에서 이들 자동화 장비를 이용해서 편리하게 항균제 감수 성 시험을 하고 있다.
한천배지 희석법(agar dilution method)
기초배지로 Muller-Hinton 한천이 흔히 사용된다. 한꺼번에 균주 30주 이상의 감 수성을 시험할 수 있다. 집락의 증식 상태를 눈으로 확인할 수 있기 때문에 다른 세균에 의한 오염을 배제할 수 있는 장점이 있다. 그러나 이 방법은 통상적인 감수 성 시험에 사용하기에는 너무 번거롭고, 비용이 많이 드는 단점이 있으며, 흔히 연

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