레포트 (31)
IPTG).OD600=0.5이상이 되면 IPTG를 1mM (500X)농도로 넣고 2~3시간 37℃ shaking incubation한다.OD600 측정값 - 조 : 2조 - OD값 : 박테리아 1, 0.526 ; 박테리아 2, 0.542Purification박테리아를 8000rpm 2분 원심분리하여 LB 배양액을 제거하고 박테리아 pellet만 남긴다. 하나의 eppen. tube당 1ml씩 두 차례 pellet down한다. 마지막 pellet
10페이지 | 1,400원 | 2011.02.18
실험일 - 2009/09/30실험제목 - 미생물의 형질전환 판별(Blue-White Screening)실험도구 - X-gal(50mg/ml)20~40㎕, Competent cell(C-cell), LB agar plate, IPTG(839mM) 5~10㎕, 미세원침관, 배양기, 얼음, pipette, spreader 실험방법 - 1.10㎕ 이하의 DNA를 100㎕ C-cell에넣고 tube를 4~5번 기울이거나 가볍게 손끝으로 쳐서 부드럽게 섞는다.*DNA
4페이지 | 2,000원 | 2015.07.17
[미생물실험]transformation 실험(형질전환 실험)/ color selection
IPTG와 X-Gal을 사용한다. IPTG는 LacZ gene inducer 역할을 하여, Lactose 대신 inhibitor와 결합하지만 분해되지는 않는다. X-Gal은 lactose 대신 beta-galactosidase에 의하여 대사되는 물질인데, 원래 무색이지만 beta-galactosidase에 의하여 대사되면 푸른색을 띤다.LacZ의 MCS에 DNA가 재조합되지 않은 박테리아의 colony는 LacZ가
5페이지 | 1,600원 | 2009.12.20
IPTG를 이용하여 His-tagged protein의 유전자 발현을 유도하였습니다. 발현된 단백질을 elution하는 방법은 metal ion에 대한 affinity competitor를 넣어주는 방법과 PH의 변화를 주는 방법이 있으나, 후자의 방법은 단백질의 구조에도 영향을 미칠 여지가 있으므로 첫 번째 방법을 택하여 실험을 진행하였습니다. 정제
5페이지 | 1,500원 | 2012.05.09
IPTG를 사용하는 이유 이번 실험에서 E-coli를 배양하기 위해 Ampicillin 배지를 사용한다. Ampicillin은 beta-lactam계 항생제로, penicillin의 유사 물질이다. Beta-lactam계 항생제는 세균의 Cell wall을 구성하는 peptidoglycan층이 형성되는 것을 방해한다. 하지만, 사용할 plasmid는 ampicillin에 대한 내성을 가지고 있다. Transfor
12페이지 | 5,000원 | 2024.02.21
PCR과 Gel running을 이용해 대장균의 plasmid 관찰실험
IPTG (1000x) 100ul, X-gal(1000x) 100ul을 넣고 흔들어 잘 섞어주었으며 플레이트에 적당량을 분주하고 식혀서 굳혔고 샘플을 150ul 획득하여 spreader로 배지에 도말하고 37°C 배양기에서 15~16시간 배양했다. 두 번째로 진행한 PCR 실험은 forward primer, reverse primer, H20, 2X Taqpolymerase Dye Mix를 섞어 Master mix를 만든 후 plate에
8페이지 | 1,500원 | 2020.12.19
[생화학실험] 단백질 정량 분석 - BCA법, SDS-PAGE 분석, Western Blot
IPTG (Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside):Lac operon에 의해 조절되는 protein의 발현을 위해 lactose 대신 넣어주는 물질로서 Lactose는 Lac Z에 의해 발현되는β-galactosidase에 의해 분해되지만, IPTG는 분해되지 않아, Lac operon을 이용한 protein 과발현에 이용된다. IPTG가 없는 경우, lac I에 의해 발현되는 repressor가 operator
12페이지 | 2,000원 | 2017.03.17
IPTG)-조절 단백질의 DNA 결합 영역 ; 인식가능한 특징적인 구조적 요소 有•특이성을 제공하는 단백질-DNA 접촉의 대부분은 수소결합DNA 염기와 수소결합하는 조절단백질의 아미노산 곁사슬; 아스파라진, 글루타민, 글루탐산, 라이신, 아지닌의 잔기에서 유래•DNA의 큰 고랑에 존재하는 염기와 상호작
9페이지 | 1,500원 | 2017.02.07
IPTG agar plate에 도말.37도에서 overnight incubation. pGEM T easy VectorTransformation형질 전환 원리 – DNA 재조합제한 효소에 의해 DNA 부분 절단Plasmid와 같은부위 절단Transformation형질 전환 원리 – DNA 재조합상보성의 염기쌍에 의해 서로 접합하고 DNA ligase에 의해 공유결합을 형성해 봉합된다재조
18페이지 | 800원 | 2016.04.16
[대사공학] catabolite regulation, induction, feedback에 대해서
IPTG)③ induction (lac operon): 분해대사 (catabolism)- inducer (allolactose) 존재: lac repressor (lac I encoding) inactive → lac repressor가 lac O에 결합 못함 → promoter에 RNA polymerase가 붙어 transcription → lactose 대사 효소들을 생산.- inducer 부재: lac repressor acive → lac repressor가 lac O에 결합 → overlap 된 promoer에 RNA polymerase가 붙지
9페이지 | 1,800원 | 2013.12.23
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- 자신의 생각이나 의견이 상대방에게 성공적으로 설득했던 경험을 상황‧행동‧결과 중심으로 구체적으로 기술하시오.
- 자신의 생각이나 의견이 상대방에게 성공적으로 설득했던 경험을 상황‧행동‧결과 중심으로 구체적으로 기술하시오. 그것을 어떻게 극복하였는지 기술하시오.
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