화학생물공정 실험 - E coli 와 Yeast Cell Culture의 생식과정을 살펴보고 Spectroscopy를 통해 이를 정량화하여 각 Cell Culture의 지수적 증식 관찰

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목차: 1. 서론
2. 실험이론
3. 실험방법
A. Reagents
i. Escherichia coli
ii. Yeast
iii. LB medium (Luria-Bertani medium) for E. coli
iv. YPD medium for Yeast
B. Equipment and Procedure
4. 실험결과
5. 실험토론
A. Data Analysis and Interpretation of Results
i. Exponential Growth
ii. Specific Growth Rate and Doubling Time
iii. Concentration Calculation from Absorbance Readings
B. Error Analysis
i. Cell Culture Environment
ii. Experimental methods
iii. Lag Phase
C. Sterilization Methods
i. Physical Methods
1. Flaming Sterilization
2. Dry Air Sterilization
3. Moist Heat Sterilization
A. Boiling Water Sterilization
B. High Pressure Steam Sterilization
C. Intermittent Sterilization (Tyndallization)
4. Ultraviolet Irradiation Sterilization
5. Filtration Sterilization
ii. Chemical Methods
1. Gas Sterilization
2. Liquid Sterilization
6. 결론
7. 참고문헌

본문내용: 1. 서론

Prokaryote란 원핵생물을 뜻하는 말로써 Carl Woese 에 의해 새로 도입된 분류법의 3가지 Domain - Archaea, Bacteria, Eukaryota - 중 진핵생물인 Eukaryota를 제외한 생물을 지칭하는 말이다. 진핵생물과는 달리 특징적으로 핵막이 없는 원핵생물은 단세포생물일 경우가 많으며 박테리아나 같은 원핵생물 및 주로 무성 생식 방법인 Binary Fission을 통해 번식한다. 이외에도 진핵생물인 Fungi에 속하는 이스트의 몇 가지 종도 Binary Fission을 하며 이를 통해 하나의 모세포가 두 개의 동일한 딸세포로 나뉘게 된다. 이번 실험에서는 Escherichia coli, Bacillus subtilis, Yeast 의 Binary Fission을 살펴봄으로 지수적 생식을 확인하고 각 미생물의 Specific Growth Rate과 Doubling Time을 계산하기로 한다.

2. 실험이론

예비보고서 참조.

3. 실험방법

A. Reagents

i. Escherichia coli

Gram-negative, Non-sporulating, Facultative Anaerobic 박테리아로 37°C 정도에서 가장 활발하게 생식한다. 최적의 환경에서 20min. 정도의 Generation Time을 가지며 주로 대장에서 기생한다.

ii. Yeast

Chemo-organotroph인 Fungi Eukaryote로써 Budding으로 생식하기도 하지만 Schizosaccharomyces pombe 및 몇 가지의 종은 Binary Fission으로 생식한다. 종마다 다소 차이를 보이지만 30°C - 37°C 정도에서 가장 활발하게 생식한다

iii. LB medium (Luria-Bertani medium) for E. coli

950ml 의 증류수에
Tryptone 10g (for peptide addition)
Yeast extract 5g (for vitamin + trace element addition)
NaCl 10 g (for Na+ addition in transport/osmotic behavior)
을 녹인 후 NaOH로 pH를 7.0으로 맞춘다. 증류수를 채워 1L 용액을 만들고 Autoclave로 멸균한다

참고문헌: A. 김영권 외 11명. “미생물학 실험”. 고려의학, 2001, pg 115-117
B. 김종협 외 2명. “미생물학 실험서”. 대광문화사, 1995 pg 11-16
C. Balasubramanian M, Bi E, Glotzer M (2004). "Comparative analysis of cytokinesis in budding yeast, fission yeast and animal cells". Curr Biol 14 (18): R806-18
D. Ingledew WJ, Poole RK (1984). "The respiratory chains of Escherichia coli". Microbiol. Rev. 48 (3): 222–71.
E. Black, J.G. (1996). Microbiology. Principles and Applications. 3rd Edition. Prentice Hall. Upper Saddle River, New Jersey. pp. 136-140, 151-153.
F. Tortora, G.J., Funke, B.R., Case, C.L. (1995). Microbiology. An Introduction. 5th Edition. The Benjamin/Cummings Publishing, Co., Inc., Redwood City, CA, pp. 155-158.
G. Johnson, Ted R. Case, Christine L. (2001). Laboratory Experiments in Microbiology 6th Edition. Benjamin Cummings.
H. Madigan et. al. (1997) Brock Biology of Microorganisms 8th Edition Prentice Hall International.
I. Lim, Daniel. (1998). Microbiology 2nd Edition. WCB/McGraw-Hill.
J. Shuler, Michael L. Kargi, Fikret. (1992) Bioprocess Engineering Basic Concepts. Prentice Hall.

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