화학실험 - TLC에 의한 엽록체 색소의 분리

그 용액이 마르면 이 과정을 몇 차례 되풀이하자. 단, 원점의 지름이 5mm가 넘지 않도록 주의한다.⑤시험관에 용매인 톨루엔을 넣고 시료를 묻힌 크로마토그래피 용지의 끝이 잠기게 한 다음 톨루엔이 원점에서 10cm 이상 상승하면 용지를 꺼내어 용매가 상승한 상단과 색소들이 이동한 지점을 연필로 표시하자.⑥분리된 각각의 색소에 대하여 다음 식으로 Rf값을 구하자.(Rf = 원점에서 각 색소까지의 거리(a)/원점에서 용매가 상승한 상단까지의 거리(b))

색소의 혼합물을 C-18 카트리지에 통과시키면 극성이 작은 색소는 C-18기와 친화적 상호작용을 하기 때문에 정지상에 오래 머물게 되고, 물과 상호작용을 더 잘하는 극성이 큰 화합물은 물을 따라 먼저 흘러나오게 된다.2. 실험 기구 및 시약실험 A. 얇은층 크로마토그래피에 의한 색소의 분리A. 실험 기구500mL 비커(beaker)시계 접시(watch glass)모세관(capillary tube)TLC 판(thin-layer chromatography plate), 폭 8cm, 높이 6cm 정도B. 시약적색 40호, 황색 5호, 청색 1호 식

TLC 판(폭 4 cmⅹ높이 6 cm), 400 mL 비커, 핀셋, 시계접시, 식용색소(적색 40호, 황색 5호, 청색 1호), - 전개제 (n-butanol : acetic acid : H2O 의 비가 60:15:25인 혼합 용액), 모세관*TLC 판 : 녹말이나 구운 석고 같은 결합제와 혼합된 알루미나나 실리카겔 같은 흡착제를 미세하게 빻은 후에 유리판 또는 플라스틱 판 위에 얇게 입혀서 이 판을 통해 물질이 이동하는 속도의 차를 이용해 용해된 화학 성분을 분리해내는 분석방법. 식품과 제약 실험실에서 하는 표준 분석

색소의 Rf 값을 구한다.⑧ 위의 여과지에 나타난 여러 밴드 중 가장 두드러지게 나타나는 녹색밴드 부위를 다른 색 밴드가 섞이지 않도록 잘라낸다.⑨ 잘라낸 것을 e-tube에 담고 1ml의 아세톤을 넣은 후 잘 흔든다.⑩ Spectrophotometer를 이용하여 380nm에서 700nm까지의 파장에서 20nm 간격으로 흡 광도를 측정하여 그래프를 그려 최대 흡수파장을 알아본다.IV. Discussion① 순수 분리하여 최대 흡수 파장을 알아본 색소는 무엇인가?② 색소의 화학적 구조와 관련

TLC는 성분에 대한 정보를 얻기 위해 사용하는 경우가 많고Column Chromatography는 본격적으로 시료를 분리해 얻고자 할 때 사용된다. 보통 Column Chromatography 전에 최저조건을 찾기 위해 TLC를 먼저 수행하는 경우가 많다. * Column Chromatography- 정지상이 들어있는 열린 컬럼 위에 중력을 이용하여 용리액을 흘려주는 실험장치로 연속적으로 이동상을 첨가하면서 화학종을 이동시키게 되는데, 이동상에 녹아있는 시료의 소량을 column 상단에 놓고 새로운 이동상(elue