[세포실험] Cell culture

Experiments in Cell BiologyExperimental ReportAttached cell culture날짜: day 1 (11/15)실습명: 세포분양, Media preparation, dilution실습 목적:Attached cell culture를 하기 위해 세포를 분양 받는다. 세포를 배양하기 위한 complete media를 제조한 후 cell과 적절하게 dilution하여 suspended cell culture를 시작한다.실험에 사용한 도구:DMEM(Eagle’s minimal essential medium)complete media(1% penicillin/streptomycin, 10% Fetal Bovine Serum),cryo media,Haemocytometer, trypan blue,incubator, trypsin/EDTA, pipettes, pipette tips, e-tube, sucti

1. 이번 실험을 통해 세포의 freeze, thaw, subculture, maintain 하는 방법에 대해 알아보고자 했다. 이 때 각각의 단계에서 어떠한 실험 과정을 거치는지에 대해 이해하는 것이 목적이다.2. 이 때 dish 위에 깔린 cell의 수를 재는 것도 중요한데 이러한 cell counting을 하는 방법을 아는 것이 또 다른 목적이다. cell counting을 할 때 어떤 기준으로 cell의 수를 측정하는 것도 중요하다. 또한 cell seeding을 할 때 어떤 과정을 거치는지 파악하는 것도 중요하

*실험 일자: 2013. 05. 24 *제출 일자: 2013. 05. 31*실험 목적: 세포 배양에서 살아있는 세포의 수를 헤아릴 수 있고 두 실험군의 세포 수를 비교 할 수 있다.*실험 재료: Hemocytometer, microscope, pipette, cleanbench, culture plate, trypsinEDTA, centrifuser, MTTsolution, DMSO, DMEM, cell(C2C12), incubator*실험 방법:-실험 1. Hemocytometer1. 세포를 배양하는 culture plate의 media를 제거한 후 trypsinEDTA를 넣는다.2. 세포 부유액을 centrifuse tube에 옮긴 후 원심분리를 한다.3. 상층액을 버

세포의 특성유지와 STAT3는 무관하다.Method&materialsCell CultureHuman cell line HSF6은 mitomycin C를 처리한 CF1 mouse의 passaging on mEF에 의해 미분화가 유지된다. 37도에서 5%이산화탄소, FGF등이 있는 DSR medium에서 배양하였다. 실험을 위해서 laminin을 깔아둔 plate에서 CM이나 DSR medium으로 cytokine이 있는 상황과 없는 상황을 만들었다.mEScell은 FBS, mLIF등이 들어있는 DMEM 배지에서 키웠다.hEScell과 mES cell은 또한 hLIF나 mLIF, hIL-6, hyper-IL-6등이 있는 상황과 없는 상황에서 culture

culture인 liquid medium에서 잘 생장한다. Liquid medium은 그 구성성분을 알 수 있는 defined medium(ex. M9)과 구성 성분을 알 수 없는 undefined medium(ex. LB)이 있는데 이번 실험에서는 LB배지를 사용하였다.b. 세포 추출물의 분리세포 추출물을 분리하고자 할 때 몇 가지 장벽을 제거해야만 한다. 세포 추출물은 세포막과 세포벽에 의해 감싸있기 때문에 이러한 cell barrier을 붕괴시켜야 한다. 이러한 붕괴 방법으로는 2가지가 있는데 물리적인 방법과 화학적인 방법이 있