[식물생리학]제한효소DNA절단과 전기영동법과 PCR에의한 DNA분리 및 확인

목 차1. 서 론- 개발 목적2. 본 론- DNA 분리 및 정제- Genomic DNA library- Screening- restriction mapping- subcloning- transformation- 유전자 발현 방법- 재조합 E. coli 와 재조합 Saccharomyces cerevisiae 비교3. 결 론1. 서 론개발목적화석연료의 과도한 소비에 따른 지구온난화 및 계속되고 있는 고유가에 따라 세계 각국은 석유를 대체 할 수 있는 새로운 에너지 개발에 앞장서고 있다. 그러한 대체에너지 개발의 일환으로 식물성 바이오매스(biomass) 자원으로부터 에탄올

의한 대량 생산 후에 플라스미드가 들어간 세포와 그렇지 않은 세포를 구별해 내기위한 selective marker, 그리고 숙주 안에서의 copy number를 조절하는 replicon, 그리고 원하는 유전자를 끼워 넣을 수 있는 insertion site 등을 가지고 있다. insertion site는 제한 효소에 의해 잘려질 수 있는 부위로 insertion site에 우리가 복제를 원하는 유전자를 삽입할 수 있다. T-vectorT-vector는 PCR을 마친 후 증폭된 DNA의 절편을 보관이나 다른 용도에 편하게 쓸 수 있도록 만든 것이

식물학자들에게는 도전하는 자세를 갖게 한다. 이것은 식물 서열화된 최초의 식물 genome이고 2000년에 완성되었고 그것들이 encode하고 있는 27000개의 유전자와 35000개의 단백질의 기능을 여전히 연구하고 있다.ref.http://www.nsf.gov/pubs/2002/bio0202/model.htmhttp://www.arabidopsis.org/portals/education/aboutarabidopsis.jsp#sumRNA 추출『리보솜 RNA나 tRNA 등은 일정한 크기와 염기서열을 가지고 있기 때문에 전기영동, 초 원심 분리 및 크로마토그래피에 의해 순수하게 분리할 수

절단부위가 모두 특이성이 있는 제한효소이므로 분자생물학 연구에 아주 유용하게 이용되고 있다. 실험에 쓰이는 제한효소는 특별한 말이 없는 한 type II를 말한다. 대부분의 type II 제한효소는 4개, 5개, 또는 6개의 염기서열을 인식하는데, 이에 따라 DNA 상에 인식부위가 나타나는 빈도가 달라지게 된다. 즉 6개의 염기서열을 인식한다면 이론상 46 = 4096 base pair 마다 한번씩 출현하게 된다. 제한효소의 명명은 발견된 세균의 이름 및 serotype에 따라서 붙이

DNA 을 첨가할수있는 정도이다. DNA단편의 크기가 극히 제한 받는다. 2) 람다게놈은 매우 커서 실제적으로 모든 제한 효소에 대해서 두개이상의 인지부위를 가지고 있다. 정상적인 람다DNA를 사용하는데 문제가 있다. ● 대장균 이외의 생물용 클로닝 벡터 1. 효모나 진균용 벡터 - Saccharomyces cerevisia (효모) : 양조나 제빵에 이용, 클론된 유전자에 의한 약품생산 2um환상DNA(2um circular DNA)->효모에서 발견된 플라스미드 2. 고등식물용 클로닝 벡터 1) Agrobacteri