1.실험목적
Osteopontin(OPN)단백질의 정량을 통해 UV정량법을 알아보자.
2.이론
❀ 단백질이란
단백질은 아미노산(amino acid)이라고 하는 비교적 단순한 분자들이 연결되어 만들어진 복잡한 분자로, 대체적으로 분자량이 매우 큰 편이다. 단백질을 이루고 있는 아미노산에 는 약 20 종류가 있는데, 이 아미노산들이 화학결합을 통해 서로 연결되어 폴리펩티드 (polypeptide)를 만든다. 이때 아미노산들의 결합을 펩티드결합이라 하며, 이러한 펩티드 결합이 여러(poly-)개 존재한다는 뜻에서 폴리펩티드라 부른다. 넓은 의미에서 단백질도 폴리펩티드라 할 수 있으며, 일반적으로는 분자량이 비교적 작으면 폴리펩티드라 하고, 분자량이 매우 크면 단백질이라고 한다.
❀ 단백질의 역할
단백질은 신체의 구성기능과 에너지를 내는 기능의 두 가지 면에서는 탄수화물이나 지방과 같다. 그러나 단백질은 탄수화물이나 지방 두 영양소와는 달리 신체에서 에너지를 내는데 쓰이지 않는다. 그 대신에 단백질은 체내에 필수적인 중요한 물질들을 만들거나 운반하고, 또는 외부로부터 이물질과 대항해 싸우기도 하며 나아가서는 뼈, 근육과 연결조직을 이루기도 한다. 또 혈액을 응고시키는 데에도 여러 가지 종류의 단백질이 필요하다. 영양 학자들이 권장하는 단백질의 섭취량은 총 섭취 열량의 15% 정도로서, 지방의 20%, 탄수화물의 65%와 비교하여 볼 때 적은 양이다.
통해 595mm에서의 흡광도 측정장점* 빠름단점 * 단백질마다 조금씩 염료가 결합되는 정도가 다름3) Lowry 방법 * 단백질 사슬의 아미노산에서 구리이온(+2)의 아마이드 결합으로 환원(+1)되는 정도를 측정하는 방법* 단백질에 따른 변이 정도가 있지만 Bradford보다 더 정확* 준비과정과 준비 시약 복잡* 5㎛/mL의 낮은 농도까지 측정 할 수 있음4) 뷰렛 방법내용* 정확성은 떨어지지만 신속하게 미량의 단백질을 정량할 필요가 있을 때 이용* 단백질의
UV-Vis 분광광도계를 이용하면 혼합 용액을 각 성분별로 분리하거나, 또는 각 금속별로 특정한 발색단을 결합시키거나 하는 번거로운 전처리 과정이 필요없이, 혼합용액 전체의 흡광도 측정을 통해 용액 중에 포함된 각 금속성분의 농도를 계산할 수 있게 되었다. 혼합시료 중에 존재하는 여러가지 성분들을 미리 분리시키는 과정없이 정량분석하는 다중성분분석법은 전파장에서의 흡광도를 한번에 측정할 수 있고 강력한 데이터 시스템이 어우러져 나
정량하는 방법이다. 이러한 방법의 이해를 위해서는 먼저 Amino Acid의 산 - 염기적 성질들을 알아야 하며 Amino Acid Titration 을 통해 각각의 Amino Acid 들의 고유한 산 - 염기적 성질 (pK,Isoelectric Point 등) 을 알수 있다.Protein 정량분석 (뷰렛법/로우리법)가. Protein 정량의 개요Protein을 Hydrolysis시키면 Peptide bond가 끊어지면서 Amino Acid가 유리된다. 보통 Peptide나 단백질을 6N HCl 용액이 들어있는 시험관에서 공기를 제거하고 밀봉한 후 100 °C 에서 8 - 24 시간 동안 가
정량하는 방법이다. 이러한 방법의 이해를 위해서는 먼저 Amino Acid의 산 - 염기적 성질들을 알아야 하며 Amino Acid Titration 을 통해 각각의 Amino Acid 들의 고유한 산 - 염기적 성질 (pK,Isoelectric Point 등) 을 알수 있다.Protein 정량분석 (뷰렛법/로우리법)가. Protein 정량의 개요Protein을 Hydrolysis시키면 Peptide bond가 끊어지면서 Amino Acid가 유리된다. 보통 Peptide나 단백질을 6N HCl 용액이 들어있는 시험관에서 공기를 제거하고 밀봉한 후 100 °C 에서 8 - 24 시간 동안 가
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hwp (아래아한글2002)
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