[유전자기술] 16.1 DNA 조작과 유전자 클론
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- 목차
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● DNA 조작에 필요한 효소
1.제한핵산중간분해효소(restriction endonuclease)
2.ligase(연결효소)
● host(숙주)와 vector(매개체) system
● 플라스미드와 파지매개체를 이용한 유전자 운반실험
● DNA라이브러리
● genome라이브러리
● cDNA라이브러리
16.2 유전공학
● 유전공학 실험의 4단계
● PCR(중합효소 연쇄반응)
● 서던흡입법
● RFLP(restriction fragment length polymorphism)
● DNA지문분석 (DNA fingerprinting)
16.3 생물공학과 과학 혁명
● 의학적 응용
● 농업적 응용
1.제초제 내성
2.해충에 대한 내성
3.식물 유전공학
4.가축에 응용
- 본문내용
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● host(숙주)와 vector(매개체) system
1.host: 세포내에서 재조합 DNA를 증식하기 위한 생물체로서
E. coli ,포유류 조직배양세포, 효모, 곤충세포 등이 있다.
2.vector: host안으로 들어가서 복제 할 수 있는 매개체.
흔히 이용되는 것으로 다음과 같이 있다.
①plasmids:세균의 세포 내에 염색체와는 별개로 존재하면서 독자적으로 증식할 수 있는
DNA로, 고리 모양을 띠고 있으며 세균의 생존에 필수적인 유전자는 아니다.
최대 10kb 클론이 가능하며 염색체와는 독립적으로 복제 가능한 복제 개시점을 가진다.
②phages:세균에 기생하는 바이러스로 최대 40kb클론이 가능하다. 가장흔히 이용되는 것은
lambda phage 이다.
● 플라스미드와 파지매개체를 이용한 유전자 운반실험
1.세균을 x-gal이 들어있는 배지에 넣을 때 청색을 만들지 못하는 것과 같은 숙주의 표현
형을 관찰하여 재조합 플라스미드를 가진 세균을 선별할 수 있다.
2.실험관 내에서 파지가 조립되고 숙주에 감염되며 숙주 내에서 증식할 수 있는 능력을 보고 재조합 DNA를 가진 파지 매개체를 선택할 수 있다.
● DNA라이브러리
특정 유전자나 DNA서열을 매개체에 집어 넣기 위해 먼저 해당 서열을
갖는 자원을 확보해야하는데 한 생물의 모든 DNA내용을 나타내는 DNA절편 모임.
● genome라이브러리
가장 간단한 DNA라이브러리. 매개체로 전체 genome을 나타낸다.
● cDNA라이브러리
cDNA 라이브러리는 세포내의 모든 mRNA에서 다음 그림과 같은 과정
을 거쳐서, 만든 cDNA들을 모은 것.
16.2 유전공학
● 유전공학 실험의 4단계
1단계: DNA절단- 제한핵산중간가수분해효소 이용하여 재료 DNA를 절편으로 조각낸다.
2단계: 재조합 DNA 만들기- DNA절편들을 플라스미드나 바이어스 매개체에 삽입시킨다.
3단계: 클로닝- 세포안으로 옮긴 DNA절편을 증식하는 것 인데 각 세포가 증식하면서 같이
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