[배양 공학 및 설계] E.coli 의 Dry Cell Weight 측정
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- 목차
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1. 서 론
2. 실험 재료 및 방법
2.1 간이 fermenter를 이용한 배양
2.2 균주의 단일성 확인
2.3 Material
3. 결과
3.1 균체의 무게
3.2 그람염색법을 이용한 접종균의 증명
4. 고 찰
5. 결 론
참고문헌
- 본문내용
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1. 서 론
E. coli 를 간이 fermenter를 이용하여 배양을 한 뒤 fermenter에서 생산된 biomass를 측정하기 위해서 stationary phase에서 균을 수거하여 Cell dry weight 를 측정하였다.
Cell dry weight 은 미생물을 배양하여 회수된 세포를 건조시켜 측정한 무게로 균체의 무게를 각각 표시하기 어려운 경우에 사용하는 정량법이다.
원심분리한 후 dry oven으로 일정 시간 동안 건조 후 pellet의 무게를 측정하여 균체량을 예상할 수 있다.
소유하고 있는 E. coli 의 identification을 위하여 gram 염색을 실시하였다. E.coli는 gram negative 균으로 peptidoglycan layer가 단일층으로 존재하고, 세포벽이 지방성분이 풍부한 lipopolysaccharide (LPS)로 이루어져 있어 organic decolorizer(탈색제)에 의해 crystal violet이 쉽게 탈색되어 따라서 염색액인 safranin O로 염색되어 붉은색을 나타낸다.
- 참고문헌
-
1. Determination of Bacterial Cell Dry Mass by Transmission Electron Microscopy and Densitometric Image Analysis
M. Loferer-Krößbacher, J. Klima, and R. Psenner*
Institute of Zoology and Limnology, University of Innsbruck, A-6020 Innsbruck, Austria Institut fur Zoologie und Limnologie, Universitat Innsbruck Technikerstr. 25, A-6020 Innsbruck, Austria. Received July 7, 1997; Accepted November 17, 1997.
2. 김영운, 홍광민, 정근우, 박찬조, “미생물을 이 용한 절삭유제의 부패성능 평가에 대한 연 구“, Korea Chem. Eng. Res. vol 44, no 4,
August 2006 pp 350~355
3. Beveridge, T.J, Davies, J.A, "Cellular respo
nses of Bacillus subtilis and Escherichia coli to the Gram stain" J. Bacteriol. 156 (2): 846-858
4. Arcadio García de Castro, Harald Bredholt, Arne R. Strøm, Alan Tunnacliffe "Anhydrobiotic Engineering of Gram-Negati
ve Bacteria", Appl Environ Microbiol. 2000 ; September ; 66(9) : 4142R
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