[생물학실험][서울대]protein over-expression(단백질과량발현)

실험적으로 밝혀야 하는 데(functional genomics), 여기에는 대략 각 유전자를 하나씩 망가뜨려 어떤 기능이 상실되는 지 알아보거나, microarray 등의 방법으로 유전자 발현양상을 조사하거나, 그리고 각 유전자에서 생산되는 단백질의 발현 및 기능을 분석하는 세 가지 접근방식이 있다.유전자의 기능을 알기 위해서는 그 유전자를 망가뜨리거나 대량 발현시키는 방법이 주로 쓰인다. 돌연변이를 만드는 방법에는 여러 가지가 있다. 제일 흔히 쓰는 방법은 trans

발현벡터를 도입한 후 MTX로서 또입한 유전자를 증폭시켜 발현량을 증대시키는 방법이 채택되고 있다. 미국 Amgen사가 CMV Promoter와 DHFR유전자를 조합시킨 벡터를 사용하고 있으며 그 외 RSV Promoter와 유전자를 조합한 벡터, SV40 Promoter와 인간 글루타민 합성 효소 유전자를 조합한 벡터등의 방법이 사용되고 있는데 이러한 방법들 역시 목적 재조합 단백질의 생산량, 생산의 지속성, 도입한 유전자의 안정성 면에서 만족한 결과를 나타내지 못 하고 있다. 따라

단백질과 아미노산 (Protein and amino acid)2) 아스파르트산 (Aspartic acid)3) 탄수화물 (Carbohydrate)4) 벌꿀 화분(Bee Pollen)5) 지용성 비타민 (Fat soluble vitamin)6) 비타민 B157) 카르니틴 (Carnitine)8) 젤라틴 (Gelatin)9) 황산화제 (Anitoxidants)10) 기타 영양물질약물 보조제1) 베타 차단제 (β-blocker)2) 엠페타민 (Amphetamine)3) 카페인 (Caffeine)4) 알코올 (Alcohol)5) 코카인 (Cocaine)6) 동화 스테로이드 (Anabolic steroid)호르몬제1) 성장 호르몬 (Growth hormone)2) 구강 피임약(Oral contraceptiv

실험용으로 사용되어 왔다. 현재는 endostatin 생성 공정에 대한 많은 시도가 이루어져 오면서 효모뿐만 아니라 E. coli, 곤충세포 등을 이용해서도 발현한 사례들이 나오고 있다. 하지만, 효모를 사용한 연구들이 가장 활발히 이루어져 왔기에 효모를 host로 사용해 endostatin 생성 공정을 설계하기로 하였다.효모는 인간 유래 단백질 생산을 위해 필수 과정인 번역 후 수식(post-translational modification)이 가능하고 endostatin을 세포 밖으로 soluble한 형태로 분비하는

실험이 경과됨에 따라 고농도의 실험구에서 부터 폐사율이 발생되어지는 것을 확인할 수 있었는데, 따라서 이 결과는 셀레늄의 과잉 공급으로 인해 폐사율이 증가했을 것으로 사료된다.조직 내 셀레늄 축적량의 증가가 사료에 첨가한 셀레늄의 농도가 증가함에 따라 유의하게 증가한 점에서 미루어 조직내 셀레늄의 축적이 폐사율과 상관관계가 있음을 예측할 수 있다.- 증체율, 사료효율, 일간성장률, 단백질전환효율에 있어서 대조구와 실험구에서